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            遂寧無塵室沉降菌測試標準操作規(guī)程

            發(fā)布時間:2023-06-26 21:41:49 人氣:5228

            <a title="無塵室" >無塵室</a>沉降菌測試標準操作規(guī)程無塵室沉降菌測試標準操作規(guī)程

            沉降菌測試標準操作規(guī)程

            1、菌落:細菌培養(yǎng)后,由一個或幾個細菌繁殖而形成的一細菌集落,簡稱CFU。通常用個數表示。

            2、測試方法:沉降法,即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿,經48小時以上培養(yǎng),在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落數,來評定潔凈環(huán)境內的活微生物數,并以此來評定無塵室的潔凈度。

            3、所用的儀器和設備

            1)高壓消毒鍋:使用時參照文件GZ-ZL-SOP-066-00進行操作。

            2)恒溫培養(yǎng)箱:必須定期對培養(yǎng)箱的溫度計進行檢定。

            3)培養(yǎng)皿:一般采用中90mm×15mm硼硅酸玻璃培養(yǎng)皿。使用前將培養(yǎng)皿置于121℃濕熱滅菌20分鐘。

            4、培養(yǎng)基:普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。將培養(yǎng)基加熱熔化,冷卻至約45℃在無菌操作條件下將培養(yǎng)基注入培養(yǎng)皿,每皿約15m1。待瓊脂培養(yǎng)基凝固后,將培養(yǎng)基平皿放入30~35℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)數小時,若培養(yǎng)基平皿上確無菌落生長,即可供采樣用,制備好的培養(yǎng)基平皿應在2~8℃的環(huán)境中存放。

            5、測試步驟

            1)采樣方法:將已制備好的培養(yǎng)皿放置在預先確定的取樣點,打開培養(yǎng)皿蓋,使培養(yǎng)基表面暴露0.5小時,再將培養(yǎng)皿蓋上蓋后倒置。
            2)培養(yǎng),時間不少于48小時。每批培養(yǎng)基應有對照試驗,檢查培養(yǎng)基本身是否污染,可每批選定3只培養(yǎng)皿作對照培養(yǎng)。

            3)菌落計數:用肉眼直接計數,然后用5~10倍放大鏡檢查,有否遺漏。若培養(yǎng)皿上有2個或2個以上菌落重疊,可分辨時仍以2個或2個以上的菌落計數。

            6、注意事項

            1)測試用具要做滅菌處理,以確保測試的可靠性、正確性。

            2)采取一切措施防止人為對樣本的污染。

            3)對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數作詳細的記錄。

            4)由于細菌種類繁多,差別甚大,計數時一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細觀察,不要漏計培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落,并須注意細菌菌落與培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別,必要時用顯微鏡鑒別。

            5)采樣前應仔細檢查每個培養(yǎng)皿的質量,如發(fā)現(xiàn)變質、破損或污染的應剔除。

            7、測試規(guī)則

            1)測試狀態(tài)

            (1)沉降菌測試前:被測試無塵室(區(qū))的溫濕度須達到規(guī)定的要求,靜壓差、必須控制在規(guī)定值內。被測試無塵室(區(qū))已消毒。

            (2)測試狀態(tài)有靜態(tài)和動態(tài)兩種,并在報告中注明測試狀態(tài)。

            (3)測試人員:測試人員必須穿戴符合環(huán)境潔凈度級別的工作服。靜態(tài)測試時,室內測試人員不得多于2個人。

            2)測試時間

            (1)對單向流,如100級凈化房間內及層流工作臺,測試應在凈化空調系統(tǒng)正常運行不少于10分鐘后開始。

            (2)對非單向流,如10000級、100000級以上的凈化房間,測試應在凈化空調系統(tǒng)正常運行不少于30分鐘開始。

            8沉降菌計數
            1)最少采樣點數目:可按表1確定。在滿足最少測點數的同時,還宜滿足最少培養(yǎng)皿數,見表2。??表1最少采樣點數目

            面積(m2)?

            潔凈度級別


            100?

            10000?

            100000?

            300000

            <10?

            2~3?

            2?

            2?

            2

            ≥10~<20?

            4?

            2?

            2?

            2

            ≥20~<40?

            8?

            2?

            2?

            2

            ≥40~<100?

            16?

            4?

            2?

            2

            ≥100~<200?

            40?

            10?

            3?

            3

            注:表中的面積對于單向流無塵室是指送風面積,對于非單向流無塵室是指房間面積。?????????表2最少培養(yǎng)皿數

            潔凈度級別?

            所需Φ90mm培養(yǎng)皿數(以沉降0.5小時計)

            100

            ?14

            10000

            2

            100000

            ?2

            300000

            2

            2)采樣點的布置:工作區(qū)測試點位置離地0.8~1.5m左右(略高于工作面)??稍陉P鍵設備或關鍵工作活動范圍處增加測點,采樣點的布置應力求均勻,避免采樣點在某 局部區(qū)域過于集中,某局部區(qū)域過于稀疏。

            3)記錄:測試報告中應記錄房間溫度、相對濕度、壓差、測試狀態(tài)及測試數據。

            4)結果計算:用計數方法得出各個培養(yǎng)皿的菌落數。平均菌落數的計算見下式:m1+m2+……+mn

            平均菌落數m=n

            式中:m為平均菌落數;m1為1號培養(yǎng)皿菌落數;m2為2號培養(yǎng)皿菌落數;mn為n號培養(yǎng)皿菌落數;n為培養(yǎng)皿總數。

            5)結果評定:用平均菌落數判斷無塵室的空氣中的微生物。

            6)無塵室(區(qū))內的平均菌落數必須低于所選定的評定標準(見表3)。????????????????????表3

            潔凈級別?

            100級?

            10000級?

            100000級?

            300000級

            標準(平均)?

            1個/皿?

            3個/皿?

            10個/皿?

            15個/皿

            7)若某無塵室(區(qū))的平均菌落數超過評定標準,則必須對此區(qū)域先行消毒,然后重新測試兩次,測試結果必須合格。


            主要參考文獻:國家標準GB/T 16294-1996


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